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如何正確使用厭氧培養(yǎng)箱進(jìn)行微生物培養(yǎng)?

更新時間:2024-10-16      瀏覽次數(shù):432

使用厭氧培養(yǎng)箱進(jìn)行微生物培養(yǎng)需要遵循以下步驟和注意事項:


1. **準(zhǔn)備工作**:

   - 確保厭氧培養(yǎng)箱放置在干燥、通風(fēng)、無振動的地方,并連接好氣源、電源。

   - 消毒并清潔培養(yǎng)箱內(nèi)外表面,準(zhǔn)備好培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞或微生物。


2. **操作室厭氧環(huán)境形成**:

   - 根據(jù)使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入無毒塑料袋。

   - 開啟電源,打開溫度控制器,并調(diào)節(jié)所需的溫度。

   - 操作室內(nèi)放入鈀粒(封閉)和干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。

   - 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并進(jìn)行真空檢查。

   - 進(jìn)行至少三次的氣體置換,第一次和第二次通常使用氮氣,第三次使用混合氣體(如N2:H2:CO2 = 85%:10%:5%)。


3. **催化脫氧**:

   - 打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧。

   - 一小時后打開美蘭指示劑觀察其變色,以確認(rèn)操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。


4. **滅菌處理**:

   - 開啟紫外線滅菌燈,對室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,滅菌時間自定。


5. **菌種的置入和培養(yǎng)**:

   - 檢查并關(guān)閉取樣室的門。

   - 將菌種放入取樣室后,打開取樣室的外門并關(guān)閉外門。

   - 取樣室充滿氮氣并更換三次,確保厭氧條件。

   - 接種棒滅菌器的應(yīng)用,使用鎳鉻電熱絲使電極短路,以致變紅進(jìn)行滅菌。


6. **操作過程中的注意事項**:

   - 在操作前,必須關(guān)閉厭氧培養(yǎng)箱門,并檢查是否密封。

   - 使用手套或消毒操作口進(jìn)行操作。

   - 不要在厭氧培養(yǎng)箱內(nèi)抽煙或使用火源等可能引起爆炸的物品。

   - 定期檢查氧氣、氫氣和二氧化碳?xì)怏w濃度,避免漏氣。


7. **停止使用**:

   - 停止使用后,將培養(yǎng)箱內(nèi)殘留的氣體*全排除,并對培養(yǎng)箱進(jìn)行清潔和消毒。


遵循這些步驟和注意事項,可以確保在厭氧培養(yǎng)箱中正確地進(jìn)行微生物培養(yǎng)。


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